Institut:Biochemie/Transformation von chemisch kompetenten E.coli

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Methode[Bearbeiten]

  1. 1-5 µl Plasmid auf 100 µl chemisch kompetente Bakterien geben; 100 µl Kontrolle ohne Plasmid.
  2. Für 20 min. auf Eis stellen; 42°C Wasserbad vorbereiten.
  3. Für 1 min. im 42°C Wasserbad (Hitzeschock).
  4. Für 1- 2 min. auf Eis stellen.
  5. Bakterien in 15 ml Falcon mit 0,5 ml LB-Medium (ohne AMP) geben.
  6. Für 1 h bei 37°C und 220 rpm in den Schüttler stellen.
  7. 50, 100 & 350 µl auf LB+AMP Platten ausstreichen, ggfs. vorher verdünnen.