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- 0,75 ml Virus-Stock entnehmen
- zentrifugieren bei 5000 rpm, 3 min, RT
- Überstand in neues Eppi geben
- 750 µl kaltes 20% PEG-8000 in 1M NaCl dazugeben
- mehrmals invertieren
- 30 min bei RT stehenlassen
- zentrifugieren (max rpm), 10 min, RT
- allen Überstand verwerfen
- Pellet in 100 µl MQ vorsichtig resuspendieren
- 10 µl Proteinase K-Lösung (5-10 mg/ml) dazugeben
- bei 50°C 1h oder bei 4° ÜN inkubieren
- 110 µl Phenolchloroform-Mischung (1:1) unter Abzug dazugeben
- zentrifugieren (max rpm), 5 min, RT
- wässerige (obere) Phase in neues Eppi überführen, Rest in Phenolchloroform-Sonderabfall
- 1/10 Volumen 3M NaOAc dazugeben
- 2 Volumen 100% Ethanol dazugeben
- bei -20°C für 20 min inkubieren
- zentrifugieren (max rpm), 15 min, 4°C
- Pellet mit 100 µl 70% Ethanol waschen
- zentrifugieren (max rpm), 5 min, 4°C
- Pellet resuspendieren in 10 µl MQ
- Colony PCR, vorher 2 min denaturieren, Annealing-Temperatur je nach Primer (meist 55-60°C)
